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    保存細胞株的時候,需要注意哪些污染風險

    點擊次數:260  更新時間:2026-05-18
    細胞株‌是指通過原代培養后成功傳代并具有穩定生長特性的細胞群體,通常來源于特定組織或個體,具備無限增殖能力或有限傳代能力,是生物醫學研究、藥物開發和細胞治療中的核心工具。
    生物性污染風險:
    ‌支原體污染‌:
    ‌特點‌:無細胞壁、體積小(0.2-0.3μm),能穿透濾膜,常規顯微鏡下不可見。
    ‌影響‌:改變細胞代謝、抑制增殖、干擾基因表達,長期存在可導致實驗數據失真。
    ‌來源‌:操作人員呼氣、未滅菌耗材、血清污染或鄰近污染細胞擴散。
    ‌防控‌:每月定期檢測(PCR法或熒光染色);新引入細胞株必須隔離并檢測。
    ‌細菌與真菌污染‌:
    ‌表現‌:培養基變渾、變色(發黃)、出現絮狀物或漂浮顆粒。
    ‌來源‌:超凈臺濾網老化、操作不規范、培養基滅菌不徹底、手套/移液器交叉使用等。
    ‌防控‌:使用前對所有試劑和耗材進行無菌檢查;操作全程保持無菌環境;避免頻繁開啟培養箱門。
    ‌病毒及其他微生物污染‌:
    雖較少見,但某些病毒可潛伏于細胞內,影響特定實驗。
    非生物性污染風險:
    ‌化學污染‌:
    來自殘留洗滌劑、重金屬、內毒素或劣質DMSO,可導致細胞應激、貼壁不良或死亡。
    ‌防控‌:使用無酶無內毒素的超純水配制試劑;DMSO選用細胞級、密封保存。
    ‌物理污染‌:
    如凍存管密封不嚴、液氮滲入導致爆炸風險;或反復凍融造成冰晶損傷細胞膜。
    ‌防控‌:凍存管擰緊但不過力;轉移至液氮前放入專用密封盒;避免多次凍融。
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