?Anti-ACA11是低豐度膜蛋白，反復凍融會對樣本和檢測結果造成明確的負面影響，核心影響按凍融次數遞增：?
?1~2次凍融?：僅10%~30%的靶標降解，對結果影響較小，一般仍可檢出信號，僅靈敏度略有下降；
?3次及以上凍融?：超過50%的ACA11發生降解，會直接導致信號大幅減弱，甚至出現假陰性；部分降解的蛋白片段還會引發非特異性結合，增加假陽性概率；
?長期反復凍融?：會導致蛋白整體變性聚集，樣本出現渾濁沉淀，內參和靶標都無法檢出，樣本失效。
反復凍融還會導致每次實驗的靶標含量不一致，直接造成實驗重復性差，結果波動大，無法得到穩定可靠的結論。
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