巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)是一種19.02kDa的造血生長因子,含有162個氨基酸殘基。該蛋白的活性:形式為同源二聚體,由成骨細胞分泌。M-CSF可控制單核細胞、巨噬細f胞和骨髓祖細胞的生成、分化和功能。M-CSF能夠通過結(jié)合其受體CSF-1R激活CSF-1信號通路。
標(biāo)記:
1.將細胞培養(yǎng)基與EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基。
2.提前將2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后將150微升2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基與等體積細胞培養(yǎng)基混合,獲得1×EdU溶液。
【注】:
①不建議替換全部培養(yǎng)基,這樣可能會影響細胞增殖的速度。
②配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜。
3.孵育細胞2h,棄培養(yǎng)基。
【注】:
①培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài)。
②大多數(shù)腫瘤細胞以及粘附細胞系均可采用2 h的孵育時間。
4.以1xPBS清洗細胞兩次,每次5min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。
【注】:對于貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。
應(yīng)用場景:
基礎(chǔ)免疫研究:用于體外誘導(dǎo)小鼠骨髓細胞分化為成熟巨噬細胞,構(gòu)建原代巨噬細胞培養(yǎng)體系,是免疫學(xué)機制研究的核心工具試劑。
藥物研發(fā)篩選:作為細胞活性因子,用于構(gòu)建巨噬細胞相關(guān)的藥物篩選模型,評估抗炎、免疫調(diào)節(jié)類候選藥物的作用效果。
動物實驗研究:體內(nèi)注射用于調(diào)控小鼠體內(nèi)巨噬細胞數(shù)量與功能,構(gòu)建免疫相關(guān)疾病動物模型,開展體內(nèi)藥效學(xué)驗證。
細胞工程應(yīng)用:配合GM-CSF等其他因子,用于體外大規(guī)模擴增小鼠巨噬細胞、樹突狀細胞,為細胞治療相關(guān)研究提供足量種子細胞。
產(chǎn)品特性:
高生物活性:重組表達產(chǎn)物與天然小鼠M-CSF活性高度一致,可在無血清培養(yǎng)體系中有效刺激骨髓細胞增殖。
高特異性:抗重組mGM-CSF的抗體可同時中和天然與重組蛋白的生物活性,無交叉反應(yīng),特異性遠高于動物源提取的天然因子。
批次穩(wěn)定性好:重組工程化表達體系可實現(xiàn)大規(guī)模穩(wěn)定生產(chǎn),批次間活性差異小于10%,避免天然提取產(chǎn)物的批次波動問題。