巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)是一種19.02kDa的造血生長因子,含有162個氨基酸殘基。該蛋白的活性:形式為同源二聚體,由成骨細胞分泌。M-CSF可控制單核細胞、巨噬細f胞和骨髓祖細胞的生成、分化和功能。M-CSF能夠通過結合其受體CSF-1R激活CSF-1信號通路。
標記:
1.將細胞培養基與EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU標記培養基。
2.提前將2×EdU標記培養基預熱,然后將150微升2×EdU標記培養基與等體積細胞培養基混合,獲得1×EdU溶液。
【注】:
①不建議替換全部培養基,這樣可能會影響細胞增殖的速度。
②配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜。
3.孵育細胞2h,棄培養基。
【注】:
①培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態。
②大多數腫瘤細胞以及粘附細胞系均可采用2 h的孵育時間。
4.以1xPBS清洗細胞兩次,每次5min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。
【注】:對于貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。
應用場景:
基礎免疫研究:用于體外誘導小鼠骨髓細胞分化為成熟巨噬細胞,構建原代巨噬細胞培養體系,是免疫學機制研究的核心工具試劑。
藥物研發篩選:作為細胞活性因子,用于構建巨噬細胞相關的藥物篩選模型,評估抗炎、免疫調節類候選藥物的作用效果。
動物實驗研究:體內注射用于調控小鼠體內巨噬細胞數量與功能,構建免疫相關疾病動物模型,開展體內藥效學驗證。
細胞工程應用:配合GM-CSF等其他因子,用于體外大規模擴增小鼠巨噬細胞、樹突狀細胞,為細胞治療相關研究提供足量種子細胞。
產品特性:
高生物活性:重組表達產物與天然小鼠M-CSF活性高度一致,可在無血清培養體系中有效刺激骨髓細胞增殖。
高特異性:抗重組mGM-CSF的抗體可同時中和天然與重組蛋白的生物活性,無交叉反應,特異性遠高于動物源提取的天然因子。
批次穩定性好:重組工程化表達體系可實現大規模穩定生產,批次間活性差異小于10%,避免天然提取產物的批次波動問題。